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西美杰邀您参加第二十三届中国生物制品大会（CBioPC）
第二十三届中国生物制品大会（CBioPC）将于2024年5月15-18日在广东省广州市召开。本届大会围绕生物医药前沿技术设置了主会场并开设多个平行分...2024-04-24更多>
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西美杰携手上游转染+下游纯化王炸组合惊艳亮相第五届CGT亚洲峰会
4月2日-3日，CGT Asia 2024第五届亚洲细胞与基因治疗创新峰会在上海成功举办。两天峰会，五大会场，汇集了来自政产学研近百位权威大咖齐聚一...2024-04-11更多>
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西美杰成功参加第九届生物制药稳定性论坛
2024年3月21日至3月23日。北京西美杰科技有限公司参加了在上海中兴和泰酒店顺利召开的2024生物药稳定性论坛，本次论坛以“解决生物制药研发和...2024-04-07更多>
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西美杰邀您参加CGT Asia 2024第5届亚洲细胞与基因治疗创新峰会
在细胞与基因治疗产业“风起云涌”的同时，对于其面临的挑战和困难的应对显得更加急迫。细胞治疗产业化与商业化模块的布局、病毒载体的攻克、...2024-03-28更多>
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PhytoTech植物组培产品促销活动
PhytoTech植物组培产品促销活动开始啦！2024-03-15更多>
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PhytoTech植物组培全线产品特惠来袭，买即赠送高品质王牌产品！
开学季来临之际，为回馈广大植物学领域研究客户，西美杰联合PhytoTech进行全线产品限时特惠活动，买即赠送高品质王牌产品！！欢迎大家前来咨...2023-10-11更多>
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Kerry 重磅福利 | Sheffield™rTrypsin ACF重组胰蛋白酶免费测试
胰蛋白酶，作为丝氨酸蛋白酶家族的一部分，是一种肽链内切酶，能够在赖氨酸和精氨酸的C端精确切割肽链。这种生物原材料在生物制品的生产过程...2023-09-20更多>
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Agrisera常见标签抗体：His、GST、GFP、Myc、HA等正在火热促销中...
标签抗体（Tag Antibody）可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列，以分析检测目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原和抗体发生...2023-09-08更多>
boutique精品展示
蛋白质结晶是研究蛋白质结构和功能的关键手段，对理解生物大分子作用、疾病机制及药物开发至关重要。它涉及蛋白质分子在溶液中规则堆积形成有序晶体的过程，受蛋白质纯度、浓度、缓冲液成分等多种因素影响。为获高质量晶体，需进行样品制备、条件筛选与优化等。蛋白结晶研究推动生物学和医学领域发展，支持药物设计和蛋白质工程。本文概述了蛋白质结晶的制备、方法、筛选、优化等要点，为相关研究提供参考。 一 蛋白质晶体的发展史 蛋白质晶体的研究始于19世纪中期，Hunefeld首先报道了血红蛋白晶体。到了20世纪，结晶技术成为提纯和研究蛋白质的重要方法，特别是John Jacob Abel对胰岛素的结晶，以及James B. Sumner对酶作为晶体蛋白质的确认。1930年代末，蛋白质晶体开始用X射线分析，开启了结构生物学的新篇章。随着遗传学和分子生物学的发展，特别是DNA技术的应用，蛋白质晶体的研究在1980年代后得到了极大的加速和变革。 二 蛋白结晶：艺术与科学的结合 尽管现代分子生物学和晶体学的进步为许多实验提供了便捷，但蛋白质结晶仍然是一个既简单又复杂的挑战。这一过程结合了科学的方法与艺术般的直觉和创造力，然而又高度依赖经验的积累。 由于生物大分子（如蛋白质）由大量不同原子以复杂方式组合，结晶过程中存在诸多变量和影响因素。这些因素包括蛋白质纯度、浓度、pH值、离子强度等，每一个变量都可能对结晶结果产生显著影响（表1和2）。 表1. 影响蛋白质晶体生长的化学变量 样品的纯度 基因修饰 样品的构象灵活性 分子的对称性 样品的均一性 样品的稳定性和变性程度 PH值和缓冲液 等电点 沉淀剂的类型和浓度 存在his标签和其他纯化标签与否 样品的浓度 热稳定性 添加剂、辅助因子、配体、抑制剂、效应剂和辅料 PH稳定性 混沌剂，如尿素、盐酸胍、硫酸铵等 样本的获取、处理、保存等历史过程 洗涤剂 蛋白水解 金属离子 微生物污染 离子强度 样品保存 还原剂或氧化剂 样品处理及相关的清洁度 样品是来源 阴、阳离子类型及浓度 无定形颗粒物质 相对过饱和度 翻译后修饰 其他试剂的初始浓度和最终浓度 化学修饰 平衡的路径和速率 表2.可能或确实影响蛋白质晶体生长的物理变量 温度 电磁场 平衡速率 结晶装置的表面 结晶方法 试剂的粘度 重力、对流和沉降 异质和外延成核剂 振动和声音 结晶装置的几何形状 样品和试剂的体积 时间 压力 试剂的介电性能 结晶实验通常从筛选开始，旨在找到能产生晶体的关键变量组合。然而，为了获得具有特定特性的晶体（如用于结构生物学、纯化或生物治疗研究），往往需要进一步的优化实验（表3和表4）。 表3.结晶方法-过饱和度的实现 气相扩散法(Sitting, Hanging, Sandwich) 序列提取（数据处理和分析技术） 分批结晶法(微分批结晶) pH诱导（简单、可控） 透析技术 (微透析技术发挥辅助作用) 温度诱导（操作简便、成本较低，需与其他方法结合使用） 自由界面扩散(逆扩散, 液桥) 效应物添加(也加Silver Bullet) 控制蒸发 表4.蛋白质结晶所用试剂 盐类 (硫酸铵、甲酸钠、磷酸铵等) 非挥发性有机物((±)-2-甲基-2,4-戊二醇、1,6-己二醇、甘油等) 聚合物 (聚乙二醇、分子量范围在200到20,000之间、乙烯亚胺、杰凡尼®等) 缓冲液 (HEPES、Tris、醋酸钠、MES等) 挥发性有机物 (2-丙醇、1,4-二氧六环、乙醇等) 添加剂 (氯化钙、氯化钠、三(2-羧乙基)膦、n-辛基-β-D-葡糖苷等) 尽管现代技术提供了丰富的资源和工具，但结晶并非仅仅是使用这些工具那么简单。成功的结晶策略需要基于一些基本原则，正如Alex McPherson等结晶领域的先驱所提出的，在进行实验之前，考虑这些原则将为您的结晶工作提供坚实的基础。 三 蛋白结晶的关键要素 样本：样本的纯度是结晶成功的基石，需细致处理以保证样本高均一性。 均一性：蛋白质样品的化学结构和分子量的一致性对形成有序晶体至关重要。 溶解度：优化样本在缓冲液中的溶解条件，追求单分散性，避免聚集和沉淀。 稳定性：确保蛋白质在结晶过程中保持结构和功能稳定，避免变性。 超饱和：通过控制超饱和度，诱导蛋白质分子有序排列形成晶核。 缔合：调控蛋白质分子间的有序相互作用，促进有序聚集，避免非特异性聚集。 成核：控制溶液中蛋白质初始结晶核的形成，以优化晶体数量、大小和质量。 多样性：尝试多种方法和条件来发现适合特定蛋白质的结晶条件。 控制：精确调控实验条件和过程，确保实验结果的准确性和可重复性。 杂质：保持样品纯度，减少杂质对结晶和后续研究的干扰。 保存：妥善保护结晶出的蛋白质晶体，防止其受到损害，确保后续研究的可靠性。 西美杰代理的美国Hampton Research公司是一家专注于蛋白质晶体研究的领先生产商，其广泛的产品组合涵盖了从结晶初步筛选到结晶优化筛选，再到定制单组分结晶试剂和结晶生长优化试剂等全方位产品。这些产品能够满足不同蛋白结晶研究的需求，包括普通蛋白、膜蛋白以及蛋白复合体的结晶。 西美杰代理的Hampton Research以其尖端的生物大分子结晶技术和实用丰富的产品线，为全球晶体研究人员提供了全面的晶体研究试剂和实验耗材。这些产品不仅极大地提升了科研人员的工作效率，而且帮助他们取得了卓越的科研成果，Hampton Research已成为晶体研究领域备受信赖的品牌之一。西美杰Hampton Research蛋白结晶热销产品 Hampton Research蛋白结晶筛选试剂盒 品牌 货号 品名 规格 简介 Hampton HR2-144 Index 10ml, tube format 蛋白质、络合物、多肽、核酸和水溶性小分子等多种试剂体系的经典结晶条件初筛选试剂盒，包含96个条件 Hampton HR2-110 Crystal Screen 10 ml, tube format 蛋白、可溶性多肽、核酸和水溶性小分子等多种试剂体系结晶条件初筛试剂盒，包含50个条件 Hampton HR2-112 CrystalScreen 2 10ml, tube format 蛋白、可溶性多肽、核酸和水溶性小分子等多种试剂体系结晶条件初筛试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-114 MembFac 10 ml, tube format 适用于膜蛋白的结晶条件初筛试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-116 Natrix 10ml, tube format 核酸、核酸/蛋白质复合物结晶条件初筛试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-117 Natrix 2 10 ml, tube format 核酸、核酸/蛋白质复合物结晶条件初筛试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-082 PEGRx1 10ml, tube format 聚合物和pH条件初筛与二次筛选试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-084 PEGRx 2 10 ml, tube format 聚合物和pH条件初筛与二次筛选试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-126 PEG/IonScreen 10ml, tube format 聚合物、盐和pH条件初筛与二次筛选试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-098 PEG/Ion 2 Screen 10 ml, tube format 聚合物、盐和pH条件初筛与二次筛选试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-107 SaltRx1 10ml, tube format 盐和pH条件初筛与二次筛选试剂盒，包含48个条件 Hampton HR2-109 SaltRx 2 10 ml, tube format 盐和pH条件初筛与二次筛选试剂盒，包含48个条件 除上述产品外，西美杰还提供包括GRAS Screen™、Grid Screen系列、Low Ionic Strength Screen、XP Screen、JBScreen Wizard等等在内的多种结晶条件筛选试剂盒，欢迎致电西美杰客服热线400-050-4006咨询订购。Hampton Research蛋白结晶优化试剂盒 品牌 货号 品名 规格 简介 Hampton HR2-072 Solubility& Stability Screen 0.5ml, Deep Well block format 溶解度和稳定性筛选，包含96个条件 Hampton HR2-413 Solubility & StabilityScreen 2 0.5 ml, Deep Well blockformat 溶解度和稳定性筛选，包含96个条件 Hampton HR2-070 SlicepH 0.5ml, Deep Well block format pH筛选试剂盒，包含96个条件 Hampton HR2-138 Additive Screen 1 ml, Deep Well blockformat 添加剂筛选试剂盒，包含96个条件 Hampton HR2-459 GRASAdditive 1ml, Deep Well block format GRAS添加剂筛选，包含96个条件 Hampton HR2-096 Silver Bullets 0.50 ml, Deep Well blockformat 添加剂筛选试剂盒，包含96个条件 Hampton HR2-407 DetergentScreen 0.25ml, Deep Well block format 洗涤剂筛选试剂盒，包含96个条件 Hampton HR2-214 Ionic Liquid Screen 0.5 ml, tube format 离子液体筛选试剂盒，包含24个条件 Hampton HR2-241 StockOptionspH 10ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含45个条件 Hampton HR2-235 StockOptions Sodium Citrate 10 ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含24个条件 Hampton HR2-239 StockOptionsSodium Cacodylate 10ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含24个条件 Hampton HR2-243 StockOptions MES 10 ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含20个条件 Hampton HR2-103 StockOptionsBis-Tris Propane 10ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含33个条件 Hampton HR2-102 StockOptions HEPES 10 ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含15个条件 Hampton HR2-227 StockOptionsPolymer 10ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含23个条件 Hampton HR2-245 StockOptions Salt 10 ml, tube format 晶体生长筛选试剂盒，包含49个条件 Hampton HR2-073 CryoPro 1ml, tube format 晶体冷冻保护剂筛选，包含48个条件 Hampton HR2-501 50% v/v Jeffamine® M-600® pH 7.0 200 ml 结晶级Jeffamine M-600用于结晶条件优化 Hampton HR2-525 50%w/v Polyethylene glycol 1,500 200mL 结晶级PEG 1500用于结晶条件优化 Hampton HR2-527 50% w/v Polyethylene glycol3,350 Monodisperse 200 mL 结晶级PEG 3350用于结晶条件优化 Hampton HR2-529 50%w/v Polyethylene glycol 4,000 200mL 结晶级PEG 4000用于结晶条件优化 以上试剂盒中的单组分条件可单独订购。除上述试剂盒外，西美杰还提供包括Proti-Ace™、Silica Hydrogel Kit、Heavy Atom Screens、I3C Phasing Kit等多款结晶优化筛选试剂盒及试剂，欢迎致电西美杰客服热线400-050-4006咨询订购。Hampton Research蛋白结晶耗材工具 品牌 货号 品名 规格 简介 Hampton HR2-320 SeedBead Kit 24tubes with PTFE Seed Bead 晶种制备珠 Hampton HR3-105 MASTERBLOCK® 96 Deep Wellpolypropylene plate 50 plate case 96孔深孔板 Hampton HR3-081 72Well Microbatch Plate, Greiner 654102 untreated,hydrophobic - 270 plate case 72孔油下结晶板 Hampton HR3-125 Swissci 3 Well MidiCrystallization Plate in UVP (40) 40 plate case 3微孔/96孔坐滴板 Hampton HR3-158 CryschemPlate 24plate case 24孔坐滴板 Hampton HR3-231 22 mm x 0.22 mm Siliconizedcircle cover slides 1.0 ounce pack (~120slides) 圆形硅化玻璃盖玻片 Hampton HR3-233 22mm x 0.22 mm Siliconized circle cover slides 10.0ounce case (~1,200 slides) 圆形硅化玻璃盖玻片 Hampton HR3-609 Crystal Clear Sealing Film 100 pack 结晶板封口膜 Hampton HR4-216 CrystalCrusher 5pack 晶体粉碎器 Hampton HR4-217 Crystal Probe 12 pack 一次性不锈钢晶体针 Hampton HR4-733 CrystalCap withVial - 60 pack 晶体环底座 Hampton HR4-811 Micro-Tools Set each 晶体处理工具套装，含8个不同形状的晶体探针 除上述产品外，西美杰还提供各种规格结晶板、loop、微桥、密封胶，Pucks等工具耗材及整套工具箱，帮助研究人员更快更高效的开展实验。欢迎致电西美杰客服热线400-050-4006咨询订购。 西美杰作为Hampton Research在中国的官方授权代理，致力于为用户提供卓越的技术支持和周到的售后服务。西美杰始终秉持“We promise what we can do. We do what we have promised”的核心理念，为用户提供优质的服务。若您想了解更多产品信息，欢迎致电北京西美杰全国客服热线400-050-4006或登录官网www.xmjsci.com进行查询和了解。 References
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Cygnus新品上市 | BL21(DE3)宿主细胞蛋白检测试剂盒
在BL21(DE3)大肠杆菌中进行重组表达，是常用的生产治疗性蛋白的有效且经济的手段。然而，制造和纯化过程中可能会受到BL21(DE3)大肠杆菌菌株中宿主细胞蛋白（HCPs）的污染，这一情况需严格控制。降低HCP杂质至最低水平，满足法规要求，是一项重要的监管任务。 Cygnus最新推出的BL21(DE3) HCP Elisa检测试剂盒（货号F1060），正是为此目的而设计，适用于纯化工艺开发与优化、过程控制、常规质量控制和产品放行等检测。 特点与优势： 基于广泛反应的抗BL21(DE3) HCP抗体，通过抗体亲和纯化和质谱测定（AAE-Mass），可检测超过90%的HCP。 具有高特异性和高灵敏度（LOD约0.4 ng/ml，LLOQ约3 ng/ml），且重复性良好。 一步法检测，可在3小时内得到实验结果。 产品信息 产品名称 中文名称 货号 规格 LOD LLOQ BL21(DE3) HCP ELISA Kit BL21(DE3)宿主细胞蛋白检测试剂盒 F1060 1 kit 0.4 ng/mL 3 ng/mL Cygnus BL21(DE3)宿主细胞蛋白检测试剂盒，一款强大而可靠的工具，能帮助您应对多样化的HCP杂质控制需求，确保生产过程的合规性，如需了解更多信息，欢迎联系销售人员或致电西美杰客服热线400-050-4006。 Cygnus宿主细胞蛋白（HCP）检测系列 Cygnus Technologies, LLC.为生物技术和生物制药行业提供产品和分析方法，旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒，用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家，Cygnus的产品和服务已经被几乎所有主要的生物制药公司使用超过25年。 北京西美杰科技有限公司作为Cygnus在中国总代理，与国内众多知名药企，CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来西美杰的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段，提高药物质量、纯度和安全，加速优化研发工艺，减少产品上市时间，降低QC成本。 更多>Pfanstiehl 麦芽糖一水合物喜获第14个CDE登记号
“ 热烈祝贺Pfanstiehl 麦芽糖一水合物喜获CDE登记号F20240000124. 这是Pfanstiehl产品获得的第14个CDE登记号！” 麦芽糖（Maltose)是一种二糖，由两个葡萄糖分子以α-1,4糖苷键连接而成。10%麦芽糖的溶液为等渗液，静脉注射给药时，被α-葡苷酶分解为两分子的葡萄糖，代谢后为肌体提供能量，对血糖水平影响很低。因此，在以蛋白质为主要成分的静脉注射制剂中，麦芽糖通常作为稳定剂发挥作用。由于麦芽糖可不依赖胰岛素而进入细胞，它的代谢不会影响到血液中葡萄糖的浓度，因此在糖耐量降低的患者中仍可安全使用。 麦芽糖分子式（图片来源www.yunkp.com） Pfanstiehl秉承一贯高品质理念，重磅推出的GMP级别麦芽糖一水合物, 具有超高纯度，超低内毒素，超低β-葡聚糖，超低微生物含量, 超低金属杂质残留(ppb级别)的特点，符合多国药典规定（USP, EP, BP, ChP），可用于生物治疗性药物和疫苗的生产。 产品信息： · 产品名称: Maltose Monohydrate. High Purity, Low Endotoxin, Low Metals · 中文名称：麦芽糖一水合物 · 分子式：C12H24O12 · 分子量：360.31g/mol · 产品货号：M-167 · DMF：028980 · CDE：F20240000124 产品特点： · 高纯度，低内毒素，低微生物含量，低β-glucan，低金属杂质残留 · 符合多国药典：USP, EP, BP, JP, ChP · 符合ICH Q3D标准 · 符合GMP标准 · 植物源 产品应用： · 蛋白质稳定 · 血液分离 · 防止IVIG溶液中的蛋白质聚集 如果您对Pfanstiehl的麦芽糖一水合物M-167感兴趣，可联系Pfanstiehl中国区代理西美杰科技获取详细的产品概况说明文件如下。也欢迎联系获取测试样品。 Pfanstiehl Inc.产品系列如下，欢迎联系Pfanstiehl中国区代理北京西美杰科技有限公司获取100g装免费样品。 北京西美杰科技有限公司为Pfanstiehl中国代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打西美杰客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>Mirus Label IT®——高效、一步法用于体内和体外核酸标记的新技术
细胞转染在科学研究中扮演着十分重要的角色，但也是最容易被忽略的一环。转染效率的高低不仅影响实验结果，甚至可能导致得到的实验结果是无效的。在多种类型核酸的细胞转染实验中，研究者们常需要进一步优化转染条件以达到最优的转染效率，特别是较难转染的细胞，而针对特定细胞类型选择对应专业化的转染试剂只是迈向转染实验成功的第一步。 成立于1995年的Mirus Bio，专注及深耕核酸递转领域多年，从最早具有低毒性的TransIT ® -LT1到GMP级别、可用于AAV和LV生产的TransIT-VirusGEN® (产品年鉴请见图1)。直至文稿发布时，使用Mirus产品发表文章已超过1万篇，并且发表文章及Mirus数据库涵盖了超过1200种细胞类型。 图1 Mirus产品年鉴 在细胞转染实验中，研究者们常常会忽略转染效率/成功率的评估，那么是否有对应技术或者方法允许实时监测DNA/RNA的成功递送以及细胞内的分布状态呢？Mirus Bio Label IT® 核酸标记试剂盒为广大的科研工作者提供了一个方向。Label IT® 核酸标记试剂盒可对任何类型核酸，进行高效、直接的标记，并且为on-step的实验操作。基于非酶反应的标记方法，在不损伤核酸完整性、不影响基因表达的前提下，将选择的标记 (荧光、生物素、地高辛等)以共价的方式连接到核酸上。 Label IT® 试剂盒有多种标签可供选择，包括 Cy®3、Cy®5、CX-罗丹明、TM-罗丹明、荧光素、MFP488、地高辛、生物素和二硝基苯基(DNP)。Label IT® 核酸修饰试剂盒（胺）也可用于基于胺的功能基团进行DNA或RNA修饰。产品特点如下： 可用于标记任何DNA或RNA模板——适用于多种应用 (In vitro & in vivo)，如Crispr基因编辑、核酸递转、RNA干扰/表达实验、FISH、Microarray等； 一步法标记——简单、轻松即可完成稳定的模版标记反应； 可根据实验需求或应用，调节标记的密度——以获得最佳检测标记 DNA 或RNA 的灵敏度； 基于共价化学反应——对核酸残基的修饰为永久性、无损伤的，是多种科研应用的理想选择。 什么是核酸标记？如何标记核酸？如何检测？ 绝大多数基于分子和生物学的In vitro 及 in vivo研究都依赖于核酸的标记或标签，理想情况下，此类标记或标签不会影响核酸功能以及研究结果。因此，也发展出来多种核酸标记方式，大致可以归为以下两类： - 化学标记法：基于结合核酸的反应基团，比如Mirus Label IT® 核酸标记试剂盒属于此类，并且整个反应过程并不需要酶的参与。 Label IT® 化学标记试剂由三个部分组成（如图2）： (1) 标签/标记 (绿色区域)； (2) Linker，与核酸进行静电相互作用 (黄色区域)； (3) Label IT® 试剂以共价形式连接到核酸中活性杂原子的烷基化基团(蓝色区域)。 图2. Label IT®标记分子示意图 - 基于酶反应标记法：通过酶促反应，在该反应过程中加入标记修饰的核酸。 当待研究的核酸加入标记后，可通过以下两种方式进行检测： - 直接检测：这时，标记的核酸中包含了可用于光学、发光或产生荧光信号的报告分子。 - 间接检测：标记的核酸带有标签或标记，该标记需要特异性的结合报告偶联分子，如生物素结合带有荧光标记的链霉亲和素，地高辛结合带有荧光标记的特异性抗体等。 Label IT® 核酸标记试剂盒——不改变核酸结构功能 基因沉默相关功能研究在分子和细胞生物学中发挥着重要作用，化学转染也在该研究领域扮演者重要角色。小干扰 RNA (Small interfering RNAs, siRNA)，常作为研究各种类型细胞中蛋白功能核酸类型，通过有效的knockdown从而影响基因表达。那么，加入Label IT®标记的核酸，是否会改变核酸结构，从而影响到后续实验结果呢？ 评估测试使用Label IT® siRNA Tracker™ 试剂盒，将相同siRNA加入不同标记 (CyTM3, CyTM5, 荧光素, CX-罗丹明 )以及没有标记siRNA，转染后，可通过荧光显微镜观察到带有标记的siRNA。基因表达结果显示，带有不同标记的siRNA，其目的基因表达水平近似，意味着加入Label IT®标记的核酸，并不影响目的基因表达及功能 (图3)。 图3 Label IT® siRNA Tracker™ 试剂盒评估测试 Label IT® 核酸标记试剂盒——前沿应用举例 应用一：使用Label IT®技术，富集CRISPR'd细胞 Nasri 和 Mir 等人在文章中阐述了如何通过 Label IT® 技术，富集 CRISPR/Cas编辑成功的细胞。基因组编辑实验面临最大的挑战之一是如何从未编辑的细胞中成功的筛选/富集出成功编辑的细胞，特别当未被编辑的细胞相对于成功编辑的细胞，具有生长/增殖优势，使得细胞筛选变得更加困难。 为了高效的区分经过基因编辑及未编辑的细胞，作者在CRISPR引导RNA ( gRNA) 与 Cas9 形成复合物及转染细胞前，使用Label IT®对gRNA进行了荧光标记，实验流程示意图如下： 研究结果表明，使用Label IT®标记的gRNA 不会影响基因编辑效率，并且可通过荧光分选/富集成功编辑的细胞群。进一步地，研究者们将该 CRISPR 实验流程应用于针对多种细胞类型的GADD45B基因编辑实验。根据细胞类型的不同，经过Label IT®标记的细胞亚群中，其成功编辑细胞占比相对于总细胞群体提了15-40%。 发表文章信息： 标题: Fluorescent labeling of CRISPR/Cas9 RNP for gene knockout in HSPCs and iPSCs reveals an essential role for GADD45b in stress response 作者: Masoud Nasri, Perihan Mir et al. 杂志: Blood Adv, Volume 3(1), Jan 2019. DOI: 10.1182/bloodadvances.2017015511 应用二：使用Label IT®技术，聚焦于免疫系统研究 Label IT® 核酸标记技术可用于一种新型疫苗注射方法-微针阵列(microneedle array, MNA)的表征研究。传统的疫苗注射方法是通过 3 厘米以上长度的针头进行皮下注射，而微针阵列则是由微米级针头所组成(示意图如下)，以无痛的方式细微的的穿透皮肤，进入到富含免疫细胞群，可减少患者的不适感。 为了提高疫苗的效力(efficacy)，通常会将免疫刺激分子或 "激动剂(agonists) "与疫苗的靶标或抗原一同加入疫苗制剂中。Edwards 等人的研究表明，双链 polyIC RNA 和单链 CpG DNA 寡核苷酸可作为微阵列中的激动剂(agonists)。并且，研究者们认为带负电荷的核酸激动剂(agonists)和带正电荷的抗原之间的静电相互作用，帮助了微阵列的组装。通过使用 Label IT® Cy®3 和 Cy®5 ，分别针对以上两种核酸类型进行荧光标记，方便用于查看标记核酸在微针上的分布，这样就允许了研究者们按照所需要的特定比例，将两种激动剂均一的加入到微阵中，从而使得精确的调整微针阵列 MNA 疫苗的免疫反应成为可能。 发表文章信息： 标题: Tuning innate immune function using microneedles containing multiple classes of toll-like receptor agonists 作者: Camilla Edwards, Robert Oakes et al. 杂志: Nanoscale, Volume 15, Apr 2023. DOI: 10.1039/D3NR00333G Label IT® 核酸标记试剂盒-产品选择 Label IT®试剂盒共有以下四种形式可供选择，以应对研究人员核酸标记实验的不同应用场景需求： Label IT® Nucleic Acid Labeling Kits Label IT®Tracker™ Intracellular Nucleic Acid Localization Kits Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kits Label IT® Nucleic Acid Modifying Kits 下表总结了不同种类Label IT®试剂盒区别： Label IT® Nucleic Acid Labeling Label IT® Tracker™ Label IT® siRNA Tracker™ Label IT® Nucleic Acid Labeling Modifying 应用 in vitro & in vivo应用的多种类型核酸标记 in vitro & in vivo质粒追踪实验 in vitro & in vivo siRNA追踪实验 DNA氨基修饰 试剂盒组分 Label IT® Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer Reagent D1& Buffer N1 G50 Microspin Columns Label IT® Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer Label IT® Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer siRNA Dilution Buffer Label IT® Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer Reagent D1& Buffer N1 G50 Microspin Columns Label IT® : 核酸比例 1 µl : 1 µg 0.5 µl : 1 µg 1 µl : 1 µg 0.5 µl : 1 µg 标记密度 每20-60 bp 1个标记 每60-140 bp 1个标记 每15-40 bp 1个标记 每20-60 bp 1个标记 标记物类型 Cy®3 Cy®5 荧光素 CX-罗丹明 TM-罗丹明 生物素 MFP488 地高辛 DNP Cy®3 Cy®5 荧光素 CX-罗丹明 TM-罗丹明 生物素 Cy®3 Cy®5 荧光素 CX-罗丹明 TM-罗丹明 生物素 氨基 试剂盒规格 25 µl 100 µl 50 µl 50 µl 25 µl 100 µl 更多有关产品常疑问FAQ，请查看官网链接 Label IT® 核酸标记试剂盒-实验优化之核酸标记密度 理想的密度取决于被标记的核酸类型及下游应用。在需要直接追踪核酸的实验中，更适合较高的核酸标记密度；而在想要维持/完整的还原标记核酸的生物学功能的实验中，则更加适合较低的标记密度。使用 Label IT® 核酸标记技术，可以轻松调整到理想的标记密度。 Label IT® 试剂与核酸的比例(v:w)的改变与标记密度呈线性相关性(图 4)。例如，按照说明的初次实验建议，需加入 5 µl Label IT® 试剂标记 5 µg DNA，此时v:w比例为1:1。在保证孵育时间和 DNA 量不变的条件下，如将 Label IT® 试剂的量降低为 2.5 µl 或 增加到10 µl，标记密度将分别降低一半或增加一倍。 实验Tips：使用过高的 Label IT® 试剂量（超过建议量的 4 倍），可能会导致核酸裂解或引起 Label IT® 荧光基团淬灭。 核酸标记密度与所使用的 Label IT® 试剂量及反应的孵育时间呈正线性相关。可通过调整反应中 Label IT® 试剂的用量或反应的孵育时间 (孵育温度仍为37℃)，可轻松灵活的调整到所需要的理想标记密度。 图4. 核酸标记密度与Label IT®试剂用量和反应孵育时间成正比 实验Tips：如何计算核酸标记密度，详细实验步骤及方法请见“Calculate Nucleic Acid Labeling Density”。 Mirus Bio公司介绍 Mirus成立于1995年，始终秉承着为基因递转提供最佳方法及最高效的工具。凭借超过 25 年转染领域的深根细作，获得了多项技术突破，已成为核酸递送领域的全球领导者和值得信赖的品牌。Mirus科学家团队不断突破转染技术的极限，推出了VirusGEN®转染试剂与RevIT™增强剂，进一步提升AAV/Lv产量，助力推动生物治疗药物的降本增效，为CGT领域客户赋能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中国区总代理，始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务，Mirus热销转染产品常备现货。如果您对上述产品感兴趣，欢迎致电北京西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多产品信息。 更多>Nereus LentiHERO™ | 一种提高慢病毒回收率与纯化效率的新技术
病毒载体技术的研究不断深入和发展，为遗传物质递送提供了理想的工具，成为目前细胞治疗与基因治疗的主要递送技术。然而，研究人员在细胞基因治疗产品的纯化工艺方面却面临着重大挑战。目前的纯化工艺大都来源于为单克隆抗体开发的解决方案，不适合用于病毒载体的纯化。而基于传统树脂色谱法有明显的局限性，如回收率低、耗时且成本高。 AstreAdept™ 是一种新型的纳米纤维材料，可有效解决粒径大且脆弱的病毒颗粒纯化面临的耗时长、回收率低且杂质含量高等问题。在这里，我们展示了该技术整合到离心管形式的Nereus LentiHERO™，并将其优势带到实验室规模的病毒载体纯化中。 高瞬时结合表面积，更高效地处理慢病毒载体 AstreAdept™采用两种不同的电纺材料（纤维素：575nm(+/- 50 nm)和非纤维素：200nm(+/- 50 nm)）交织形成特性优越的复合膜结构，可使产物溶液在高流速条件下快速扩散到高结合表面积（图1），实现无阻碍的进入孔道。将该技术整合到层析纯化基质的LentiHEROTM将慢病毒纯化带入一个新的纪元。 图1. AstreAdept™ 新型的复合纳米纤维材料解决脆弱大分子纯化的瓶颈问题。 无阻碍液体流动系统优点： 结合表面积更大 高回收率 高流速 Nereus LentiHERO™ 用于慢病毒纯化 图2. Nereus LentiHERO™ 仅需5步离心即可实现慢病毒快速纯化 Nereus LentiHERO™显著提高慢病毒回收率 高动态结合载量与高回收率，提升实验室规模慢病毒生产效率。 图3. 15%穿透时，每根离心柱的动态结合载量1.9E+10。 Nereus LentiHERO™离心柱以20 mv/min的速度上样，流穿收集在10mL液体中，使用p24 ELISA分析，基于上样的总VP，计算VP穿透百分比。 图4. 有无血清培养体系慢病毒回收率：纯化后样品中慢病毒/病毒原液%。 血清(-) n=3，血清(+)n=2 • 高流速条件下不影响动态结合载量 • 保留时间 < 1s • 无血清培养体系LV回收率＞60% Nereus LentiHEROTM宿主细胞蛋白残留降低95%以上 降低HCP残留在实验室规模的样品生产同样重要，可显著减少非必要的免疫反应。 用Nereus LentiHERO™纯化的样品 • 95% 宿主蛋白的去除 • 通过SDS-PAGE，洗脱液中检测不到宿主蛋白 • 不论培养体系中有无血清，都能显著去除宿主蛋白图5. Nereus LentiHEROTM可去除95% 以上宿主蛋白 Nereus LentiHEROTM对病毒结构和感染效力影响很小 Nereus LentiHERO™ 纯化后的慢病毒颗粒保持了原有的功能、形态和大小 • 重要结构蛋白完整，如编码了衣壳、基质与核衣壳的Gag蛋白 • 慢病毒颗粒大小和形态无改变 • 纯化后的慢病毒感染活力未降低 图6. 通过WB、电镜和细胞感染实验分别对比了Nereus LentiHERO™ 纯化前后慢病毒结构蛋白的完整性、颗粒形状大小与感染活力均未受到显著影响。 Nereus LentiHEROTM兼具了产量、纯度和时间效益 • 一台台式离心机即可实现高通量病毒纯化 • 宿主细胞蛋白去除的同时样品洗脱体积减小（浓缩） • 高纯度、小体积样品的进一步浓缩更节省时间 Nereus LentiHERO™ 性能总结 • 一种新型基于纳米纤维膜的AstreAdept™ 技术为病毒载体纯化工艺赋能 • 易于操作的设计，实现了功能性慢病毒颗粒的快速纯化和高回收率 • 能显著降低如宿主细胞蛋白（HCP）等杂质的含量 • 可以同时处理多个样品, 突破病毒载体开发样品制备的瓶颈 图7. LV 纯化高得率，高通量，高纯度，适用于小体积慢病毒样本，操作时间短。 综上所述，该技术提供了一种更具成本效益和时间效率的方案，提高研究人员对新型细胞和基因治疗项目的开发，助推新型生物治疗药物惠及广大患者。 产品信息*： 品名 货号 规格 Nereus LentiHEROTM NL100100 2 unit pack *采用相同技术适用于工艺放大的LentiHERO® 1与LentiHERO® 10预装柱产品已上市，欢迎咨询Astrea Bioseparations代理商北京西美杰科技有限公司。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自剑桥大学，拥有超过30年层析介质研发和生产经验，是世界级层析介质产品与服务供应商。目前使用Astrea的产品已有超过21个生产工艺通过了FDA和EMA的批准。Astrea在希腊语中是“星际少女”的意思，象征着正义、纯真、纯洁和精确。使用Astrea Bioseparations这个名字体现了我们在工作中对纯洁、精确和人性一如既往的关注。Astrea Bioseparations在全球拥有3个研发和生产基地，专注为生物大分子和CGT领域提供行业领先的层析介质和技术服务。Astrea Bioseparations推出的基于纳米纤维的新型层析技术，解决了传统生物分离工具载量低和工艺耗时问题，实现更快、更环保、更具成本效益的纯化过程，完全符合当今生物治疗创新的需求。 北京西美杰科技有限公司是Astrea Bioseparations品牌在中国的一级代理商，如您对上述产品感兴趣，欢迎随时拨打西美杰客服热线400-050-4006或登录西美杰官网www.xmjsci.com查询订购。 更多>喜大普奔！Pfanstiehl D-甘露醇（注射用）CDE登记号已激活！
“ 热烈祝贺Pfanstiehl品牌D-甘露醇（注射用/M-109-7）CDE注册登记号F20190000351已激活！”甘露醇是一种糖醇，通常由甘露糖还原而来，是山梨醇的同分异构体，易溶于水，为白色结晶性粉末，有类似蔗糖的甜味。甘露醇是一种很普遍的蛋白质冻干保护剂。甘露醇对蛋白质的保护作用与其浓度、形态结构密切相关。通常认为无定型甘露醇具有稳定蛋白质的作用而结晶态的甘露醇则失去保护功能。甘露醇的纯度对其保护蛋白质的稳定性至关重要。 Pfanstiehl品牌D-甘露醇，秉承一贯高品质理念，按照ICHQ7质量体系生 产，具有高纯度，超低内毒素，超低微生物含量的特点，并单独检测29种金属离子含量（ppb水平），符合多国药典，满足生物制药和疫苗对于注射级别甘露醇的生产要求。 产品信息： ·产品名称: D-Mannitol（Plant Derived）High Purity/Low Endotoxin-Low Metals USP/EP/JP/ChP ·中文名称：D-甘露醇·分子式：C6H14O6 ·分子量：182.17 g/mol ·CAS号：69-65-8 ·产品货号：M-109-7产品特点： ·超高纯度，超低内毒素，低微生物含量，低金属杂质残留 ·符合多国药典：USP, EP, JP, ChP ·符合ICH Q3D标准 ·符合GMP注射级标准 ·植物来源 ·美国DMF号032464 ·中国CDE登记号F20190000351已激活产品应用： ·冻干保护剂 如果您对Pfanstiehl的D-甘露醇M-109-7感兴趣，可联系Pfanstiehl中国区代理北京西美杰科技有限公司获得详细的产品概况说明文件如下。也欢迎联系获取测试样品。 美国Pfanstiehl Inc.简介： Pfanstiehl Inc.成立于1919年, 公司总部位于美国芝加哥市北郊沃吉根工业区，是美国老字号企业之一，也是一家真正的cGMP生产商。作为一家有着百年基业和沉淀的公司，Pfanstiehl Inc立志将产品质量做到极致，是全球生物制药领域超纯糖类、氨基酸类以及其他尖端分子的领先生产商，迄今已服务全球蛋白药、抗体药、疫苗、mRNA及核酸类药物等领域100年以上。Pfanstiehl Inc. 超高纯度、超低内毒素，超低金属离子含量的辅料制剂产品，全面的技术和法规审计支持，真正的cGMP质量控制体系，接受FDA的定期监察审计等都被国际知名生物制药公司所认可。Pfanstiehl Inc.是全球超高纯度、超低内毒素、超低金属离子含量等注射级糖类的领先制造商，产品生产均参照ICHQ7质量体系。自2015年进入中国市场以来，Pfanstiehl Inc.已获得13个 CDE登记号，主要产品含括海藻糖，蔗糖，D-甘露醇，组氨酸，组氨酸盐酸，精氨酸，精氨酸盐酸，琥珀酸钠，甲硫氨酸等，其中海藻糖F20170000098，甘蔗源蔗糖F20180001457和甜菜源蔗糖F20170000125， D-甘露醇F20190000351的CDE号均已激活。 Pfanstiehl Inc.于2023年又重磅推出注射级Tris和Tris HCl，这将是全球高质量的Tris和Tris HCl。作为一家有着百年历史的企业，Pfanstiehl Inc. 也在持续投资，不断扩充产品管线和扩大生产产能，以满足和支持全球生物制药行业的快速发展，特别是更好的助力中国生物制药的发展需求。北京西美杰科技有限公司为Pfanstiehl中国区代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打西美杰客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>新品上市！大包装RevIT™ AAV Enhancer，助力于AAV病毒大规模生产！
2023年7月底Mirus上市RevIT™ AAV Enhancer，在不同AAV血清型别中，可提高AAV病毒基因组滴度1.2-4.9倍，并且在一定程度改善了实心率。由于可轻松的将revIT整合入现有AAV生产工艺工作流程中，不仅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂，也适配于其他转染试(如PEI等)，降低了AAV病毒上游生产成本，从而推动基因治疗单剂量成本的下降。 自RevIT™ AAV Enhancer上市后，已收到来自全球客户包括知名药企、CDMO/CRO测试反馈及好评。从起初摇瓶的小规模评估阶段到500L反应器的大规模评估阶段、从使用商品化的细胞/培养基到自制细胞/培养基体系、从只局限的关注AAV病毒滴度到实心率及其他更多参数指标，RevIT的表现不断突破客户对现有体系优化的局限性。因此，也带来更多产品需求，包括推出更大的包装，以满足大规模阶段性评估。除此之外，为了满足后续临床注册或者商品化阶段GMP级别需求，Mirus计划在2024年底前推出GMP级别，以便更好的服务全球客户。 产品详情： 产品名称: RevIT™ AAV Enhancer 产品规格：75mL / 瓶装 产品货号: MIR8080 上市日期：2024年1月17日 产品特点和优势： 提升AAV病毒生产的载量: RevIT™ AAV Enhancer，针对不同血清型、细胞培养基、转染试剂种类，可2-4倍稳步地提高AAV病毒载量； 成本效益: 更低质粒DNA用量，降低了病毒上游的生产成本的同时，也带来了实心率/病毒质量的提升；优化了生产工艺的同时，减少了AAV病毒生产所需原料； 生产工艺整合灵活性&简便性: RevIT™ AAV Enhancer可轻松的整合到您现有AAV病毒生产工艺的工作流中，灵活的加入时间点、广泛的适配性，进一步提升AAV病毒载量； 兼容性： 适配于基于单个组分的转染试剂(如PEI)或Mirus VirusGEN® 转染试剂，并且AAV病毒滴度及实心率都有着不同程度的改进； 搭配 TransIT-VirusGEN®性能更佳: 当与 TransIT-VirusGEN®搭配使用时，整体性能上优于基于Polymer的单组份转染试剂(如PEI)。 使得基因治疗面向更多人群成为可能： 结合AAV生产上游和下游工艺的不断优化，为下一代基因疗法惠及更多患者铺平了道路。 更多RevIT™ AAV Enhancer数据及RevIT™ AAV Enhancer详细信息，请见微信软文《新上市RevIT™ AAV Enhancer， 提高AAV产量的又一利器！》相关产品信息 产品名称 规格 货号 RevIT™ AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 NEW 75 ml MIR 8080 VirusGEN® AAV转染试剂及 RevIT™ AAV Enhancer（套装） For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN®转染试剂 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN® GMP级别转染试剂 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN® AAV转染试剂(套装) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN® GMP级别AAV转染试剂(套装) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN® LV转染试剂(套装) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN® GMP级别LV转染试剂(套装) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP 美国Mirus公司成立于1995年，是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司，同时也是目前该类试剂主要的供应商之一。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者，其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中国区代理，始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务。如果您对上述产品感兴趣，欢迎致电北京西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多产品信息。 更多>Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型
基于需要递转不同种类核酸/蛋白类型研究，在细胞转染环节，研究者们常碰到如下三类问题：细胞对化学试剂较为敏感，转染后，细胞活率下降或死亡；研究常用细胞类型较多，不同类型细胞，转染效率差异较大，导致单个转染试剂或者实验流程，无法满足实验需求；递转多种类型核酸或蛋白，需要挑选对应的转染试剂，并且需要大量实验优化，才可以得到较高的转染效率。有没有一款化学转染试剂，可以同时应对常规到难转染的细胞类型，有着较低的细胞毒性，并且适用于多种核酸/蛋白类型递转呢？兼具多重功能、高性能的TransIT-X2®转染试剂，可同时应对常见细胞及难转染细胞类型，避免条件摸索和大量的重复性实验，轻松得到您理想的实验结果。已验证在大多数细胞类型中（如贴壁/悬浮细胞、原代细胞、神经细胞等），都有着优异的转染效率、低毒性（特别相对于形成脂质体复合物的Lipofectamine®系列试剂）、高性能的表现；适用于多种研究领域，包括但不限于干细胞研究、基因编辑CRISPR研究、RNAi基因干扰/沉默、稳转细胞株构建、低毒性的转染实验、共转染实验等；允许高效且稳定的同时递转多种核酸/蛋白类型，包括但不限于质粒 DNA、siRNA/miRNA 和 CRISPR/Cas9 组分。为什么Mirus TransIT-X2® Dynamic Delivery System有着如此高性能及广泛适应性呢？这归因于Mirus强大且高效的专利递转平台设计，可进行多重、多功能组合的转染试剂组分筛选并优化。成立于1995年的Mirus，专注及深耕核酸递转领域多年（图1），从最早具有低毒性的TransIT ® -LT1到GMP级别、可用于AAV和LV生产的TransIT-VirusGEN®，都是基于该递转平台进行设计及开发的。截至目前，使用Mirus产品发表文章已超过1万篇，并且发表文章及Mirus数据库涵盖了超过1200种细胞类型，更多文章及数据查询，请点击这里。图1 Mirus产品年鉴 不同于传统基于单组分的转染试剂（如阳离子聚合物或阳离子脂质体），为了进一步提高转染效率，以应对不同细胞类型或特定的应用。Mirus将专利的多聚物(Polymer)及脂质(Lipids)技术进行多重组合，在不形成脂质体复合物（即liposome，通常具有细胞毒性）前提条件下，得到多种类、高性能的转染方案，克服细胞递转过程中的多重阻碍，以实现更高效转染和更低的细胞毒性（图2）。图2 Mirus转染试剂原理示意图 基于上述Mirus强大、高效的专利递转平台设计，在进行多重、多组合筛选、优化及后续验证，独有的智能迭代设计流程，优化转染技术中的每个组分（图3）。Mirus推出一系列经典转染试剂，以应对多种需求：广谱、高性能、低毒性的转染试剂家族: TransIT-X2®、TransIT®-LT1、TransIT®-2020针对特定细胞类型的转染试剂家族：TransIT®-293、TransIT®-BrCa、TransIT®-CHO、TransIT-HeLaMONSTER®、TransIT®-Insect、TransIT®-Jurkat、TransIT®-Keratinocyte针对特定应用的转染试剂家族：- 病毒生产：VirusGEN® 转染试剂及配套试剂盒、TransIT®-Lenti- 蛋白/抗体生产：TransIT-PRO®、CHOgro® Expression System、CHOgro® High Yield Expression System寡核苷酸递转的转染家族：TransIT®-Oligo、TransIT-siQUEST®、TransIT-TKO®mRNA及长链RNA递转：TransIT®-mRNA图3 Mirus独有智能迭代设计，转染试剂优化流程示意图 Mirus TransIT-X2®转染试剂性能数据展示Mirus TransIT-X2®Dynamic Delivery System递转表达EGFP质粒DNA分别至A549、CHO-K1、Hep G2、MDCK、LNCaP、PC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和正常人真皮成纤维细胞(NHDF)细胞中。实验使用96孔板， TransIT-X2®试剂加入量为0.2-0.4µl，DNA加入量为0.1µg(使用试剂:DNA=2:1、3:1或4:1)。转染后48小时，使用Guava® easyCyte™ 5HT流式细胞仪重复检测三次，评估转染效率。图4 TransIT-X2®在包括原代细胞在内的多种细胞类型中都具有较高转染效率 使用TransIT-X2®(Mirus Bio)、Lipofectamine®2000 (Thermo Fisher Scientific)或Lipofectamine®3000 (Thermo Fisher Scientific)转染荧光素酶编码质粒DNA至A549 (A)或MDCK (B)细胞中，转染24小时，通过荧光素酶活性评估转染效率，定量受损细胞中释放的LDH评估细胞毒性。与Lipofectamine®2000或Lipofectamine®3000的细胞相比，在最佳试剂:DNA比例下，Trans - x2®有着更高的荧光强度及更低的细胞毒性。图5 相较于使用单一组分且形成阳离子脂质体复合物(liposome)的Lipofectamine®系列转染试剂，TransIT-X2®有着更高的转染效率及更低细胞毒性 实验Tips: 针对更多特定细胞类型，试剂使用建议，详细请见：Cell-type specific transfection protocol recommendations (PDF). Mirus TransIT-X2®在RNAi干扰实验中性能数据展示基因沉默相关功能研究在分子和细胞生物学中发挥着重要作用，化学转染也在该研究领域扮演者重要角色。常见参与RNAi干扰途径的天然RNA分子包括：- 小干扰 RNA (Small interfering RNAs, siRNA) ：由双链 RNA(dsRNA)断裂所产生的短双链 RNA(20-25bp)；- 微小 RNA(MicroRNAs, miRNAs) ：非编码 RNA 处理后所产生的一类短的、单链 RNA(20-22nt)。利用 RNAi 抑制基因表达的另一种方法为短发夹 RNA(short hairpin RNA , shRNA)，这些短 RNA 序列可通过病毒或非病毒载体方式进行表达，更多详细信息可查阅Mirus Applications | RNAi Gene Silencing。 图6 不同RNAi干扰途径示意图 TransIT-X2®Dynamic Delivery System和Lipofectamine®2000转染试剂用于转染siRNA(靶点为内源性蛋白质- GAPDH和AHA1)，对照使用正常人类真皮成纤维细胞(NHDF)递转非靶向siRNA。Trans IT-X2®加入量为4µl， Lipofectamine®2000加入量为6µl，siRNA加入量都为25 nM。使用qRT-PCR相对于18s rRNA水平测量GAPDH或AHA1 mRNA进行检测，转染后48小时均一化至非靶向对照组的mRNA水平，误差则为三次复孔实验的标准差。图7 基于siRNA核酸递转类型的基因沉默研究，相比Lipofectamine® 2000，TransIT-X2®有着更高的基因沉默效率 TransIT-X2®Dynamic Delivery System和Lipofectamine®2000转染试剂用于转染Pre-miR™ hsa-miR-1 miRNA Precursor 或者mirVana™ miRNA mimic, miR-1 (两者都已验证，可降低PTK9 mRNA表达水平)。Pre-miR™阴性质控用于评估mRNA表达水平基线值。Trans IT-X2®及Lipofectamine®2000试剂加入量都为3µl， 加入50 nM miRNA。使用qRT-PCR相对于18s rRNA水平，经过阴性质控的均一化，得到PTK9 mRNA表达水平值。图8 基于miRNA (miRNA Precursor及miRNA mimic)基因沉默研究，相比Lipofectamine® 2000，TransIT-X2®有着更高的基因沉默效率 Mirus TransIT-X2®在CRISPR基因编辑实验中性能数据展示经过改造及优化的细菌 CRISPR/Cas9 系统，已被广泛应用到哺乳细胞的基因编辑中。基于CRISPR基因编辑实验常见两组分：Cas9蛋白及引导RNA(gRNA)。当Cas9蛋白切割了靶向基因组DNA，会触发两种内源性修复机制，即非同源末端连接(NHEJ)和同源定向修复(HDR)，以应对细胞中产生的DNA断裂。基于NHEJ细胞修复通路，为非精准、且容易出错细胞修复通路，可引入导致基因功能缺失的Indel。基于HDR的细胞修复通路，则需要额外的同源 DNA 作为修复模板，从而实现“精准”修复，在目的基因插入特定的基因或长片段序列。根据研究者们不同的实验需求，CRISPR基因编辑可以有多种类型实验设置，这意味需要面对不同核酸类型的转染甚至共转染，举例如下：1. 质粒pDNA转染作为CRIPSR实验关键两组分：Cas9蛋白及gRNA，可以设计单个质粒DNA，共同表达两组分(A)；或者使用两质粒系统，其中一个质粒表达Cas9蛋白，另外一个质粒表达gRNA(B)；当使用Cas9切口酶(Nickase)，则需要两条gRNA，这时可能需要三质粒系统的递转实验。2. 质粒DNA及RNA寡核苷酸共转染此时，与上述实验设计不同的是，gRNA以寡核苷酸形式进行递转，这就意味着递转实验需要同时转染质粒DNA以及RNA寡核苷酸(A和B)。3. mRNA及RNA寡核苷酸共转染为了避免由于质粒DNA基因组整合而导致的脱靶效应，可以共转染编码Cas9蛋白的mRNA及gRNA (RNA寡核苷酸)。4. Cas9/gRNA RNP复合物递转随着Cas9蛋白及gRNA商品化趋于成熟，越来越多的研究者们选择直接从第三方购买高保真Cas9蛋白，以及有着额外化学修饰且在细胞内更稳定的gRNA寡核苷酸。除了极大的缩短和简化CRISPR实验流程外，相对于质粒或者mRNA方式合成，直接递转RNP复合物的方式有着更高的特异性及编辑效率。实验Tips: 针对上述不同CRISPR实验设计及递转情形，TransIT-X2® Dynamic Delivery System经优化的具体实验说明， 下载链接如下：TransIT-X2® for CRISPR Plasmid + gRNA Delivery (PDF) TransIT-X2® for CRISPR Plasmid Delivery (PDF) TransIT-X2® for CRISPR RNP + ssODN Delivery (PDF) TransIT-X2® for CRISPR RNP Delivery (PDF)使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System (2 µl/孔，24孔板, Mirus Bio)共转染0.5 µg质粒DNA(表达Cas9蛋白)及50nM 2-part gRNA (PPIB基因)至HEK293T/17, U2OS 及NHDF细胞中，转染后48小时，T7E1验证切割效率。图9 质粒DNA和gRNA寡核苷酸共转染：TransIT-X2®分别在293T/17、U2OS和NHDF细胞中共转Cas9质粒DNA与gRNA(RNA寡核苷酸)，都有着较高的基因编辑效率(18-48%) 2-part gRNA (PPIB基因，IDT) 及Cas9 蛋白(PNA Bio)形成RNP复合体，分别使用TransIT-X2® Dynamic Delivery System(1 µl/孔， Mirus Bio)、Lipofectamine® CRISPRMAX™ (1.5 µl/孔， ThermoFisher) 、Lipofectamine® RNAiMAX (1.5 µl/孔, ThermoFisher) 、Lipofectamine® 3000 (1.5 µl/孔ThermoFisher) 递转至293T/17及U2OS细胞中。测试gRNA两种使用量(6 nM或12 nM)，相同Cas9 蛋白加入量(6 nM)，转染后48小时，T7E1验证切割效率。图10 Cas9/gRNA RNP复合体递转：相较于Lipofectamine®系列转染试剂，TransIT-X2®有着更高的切割效率 Mirus TransIT-X2®产品优势☑新型基于多组分开发的广谱型转染试剂(适用于多种细胞，包括难转细胞)；☑ 可同时转染核酸及蛋白，包括不限于DNA，siRNA/miRNA和CRISPR/Cas9复合物；☑不形成脂质体复合物，降低细胞毒性；☑ 满足多种应用：基因过表达、基因沉默、基因编辑、干细胞研究、稳转细胞株构建等。 相关产品信息产品名称规格货号TransIT-X2® Dynamic Delivery System1 × 0.3 mlMIR 60031 × 0.75 mlMIR 60041 × 1.5 mlMIR 60005 × 1.5 mlMIR 600510 × 1.5 mlMIR 6006 文末福利：关注西美杰微信公众号“xmjsci”，回复关键词“X2试用”，填写信息即有机会免费获取100μl TransIT-X2®转染试剂试用装。试用成功后还可享优惠折扣购买TransIT-X2®正装哦，快来试用抢购吧！美国Mirus公司成立于1995年，是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司，同时也是目前该类试剂主要的供应商之一。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者，其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。北京西美杰科技有限公司是Mirus中国区代理，始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务。如果您对上述产品感兴趣，欢迎致电北京西美杰客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多产品信息。 更多>
S100A8 / S100A9（MRP（8/14）是一种钙结合蛋白，由中性粒细胞和单核细胞分泌而成，粪便中S100A8 /
S100A9是赘生性和炎症性胃肠疾病的标志物，一般情况下很难区分肠易激综合症和慢性炎症性肠病，所以很多时候会导致广泛和不必要结肠镜检查，而S100A8 / S100A9检测可以使两组患者明确区分。将该标记物与结肠直肠癌的标准粪便潜血筛查进行比较，能够清楚地证明了粪便S100A8 / S100A9测试的诊断优势，该参数具有较高的诊断价值：如果粪便中的S100A8
/ S100A9水平较低，则很可能不存在器质性疾病。Immundiagnostik（IDK）公司能提供大/小鼠钙结合蛋白S100A8/S100A9检测试剂盒（酶联免疫法） ，用于定量大/小鼠粪便、血清、尿液、组织提取液及细胞培养上清液中的S100A8/S100A9(钙卫蛋白MRP8/14 )。货号KR 6936品名S100A8/A9(MRP8/14, Calprotectin, Mouse/Rat) ELISA规格96tests孵育时间1h/1h/1h/5-15min样本类型大/小鼠粪便，血清，尿液，组织提取液样本量100µl/100mg校准品0.25-15.6ng/ml方法酶联免疫法 品牌IMMUNDIAGNOSTIK储存条件2-8℃产品说明说明书下载相关文献Hildebrand, F. et al., 2013. Inflammation-associated
enterotypes, host genotype, cage and inter-individual effects drive gut
microbiota variation in common laboratory mice. Genome biology, 14(1), p.R4.Nelson, D. a et al., 2012. An expanded
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gammaherpesvirus-exacerbated breast cancer metastases. Infectious agents and
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is associated with receptor for advanced glycation end products ligation of
LPS. Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950), 186(5), pp.3248–57.北京西美杰科技有限公司为Immundiagnostik（IDK）中国代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打西美杰客服电话400-050-4006或者登陆网站
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植物组织培养中一部分抗生素被用于去除或者抑制微生物生长，如青霉素、氯霉素、利福平等；另一部分用于抗性筛选的抗生素，如潮霉素B、G418、双丙氨膦等，他们大多数能够抑制或者干扰某些重要蛋白质的合成，可以在含有这些抗生素的培养基中筛选得到目的植株的阳性克隆。每种抗生素的抑菌谱不同，不同的植物对抗生素表现出不同的敏感性。例如，一种抗生素对某些植物的毒性很小，而对其他物种的毒性是极大的。所以没有固定推荐的使用浓度，建议抗生素在使用之前，应该对样本相对于抗生素的敏感性进行预实验，确定药物使用最佳浓度和最佳作用时间，然后开展正式的实验。一般来说，抗生素需要储存在冰箱中。氨基糖苷类抗生素（如卡那霉素）具有吸湿性，应储存在干燥器中。所有抗生素都应不受阳光直射。利福平和两性霉素B对光非常敏感，应该储存在黑暗中。多数抗生素对热敏感，需要过滤灭菌，最好是现用现配，尽量减少溶液反复冻融次数，防止抗生素失效。 羧苄青霉素（货号：C346） 羧苄青霉素是一种白色至灰白色、吸湿性粉末，可溶于水。羧苄青霉素对革兰氏阴性菌最有效，但对革兰氏阳性菌也有一定的作用。据报道，羧苄青霉素水溶液在35℃、pH 5.5下稳定40小时。溶液可以在-20℃储存24个月。羧苄青霉素对多种植物的毒性相对较低，据报道，在植物组织培养中使用的浓度可高达1000 mg/L。头孢噻肟钠（货号：C380） 头孢噻肟钠是一种白色到灰白色的粉末，可以溶于水。新制备的溶液颜色的变化并不一定表明效力的变化。需储存在一个防光的密封容器中。头孢噻肟钠的水溶液在pH值范围为4.3-6.2时最为稳定。溶液可在-20°C下保存48个月。头孢噻肟钠对革兰氏阴性菌最有效。 潮霉素B（货号：H370） 潮霉素B是一种氨基糖苷类抗生素，对原核微生物和真核微生物和细胞均有效。推荐浓度范围为10 - 400µg/mL。原液可在2-6℃下储存至少1年；溶液不应冷冻，因为这样会降低其效力。 上述小编只是简单介绍了下常用抗生素的基本性能，下方小编总结了PhytoTech Labs部分常见抗生素的分子量、抗性等特性，方便广大植物学客户选择： 品名 货号 分子量 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 分枝杆菌 真菌 支原体 植物毒性浓度2 溶剂 两性霉素B A119 924.1 ++ >5 DMSO 氨苄青霉素 A116 371.4 ++ ++ 100 Water 羧苄青霉素 C346 422.4 + ++ >1000 Water 头孢噻肟钠 C380 477.4 + ++ >100 Water 头孢氨苄 C1970 365.4 ++ + Water 氯霉素 C252 323.1 ++ ++ + + 1-64 EtOH G418 G810 692.7 50 Water 硫酸庆大霉素 G570 575.7 + ++ ++ 80 Water 潮霉素B H370 527.5 20-400 Water 卡那霉素 K378 582.6 ++ ++ ++ 2 Water 多粘菌素B P6809 1385.6 ++ Water 利福平 R501 822.9 ++ ++ ++ 100 Water 壮观霉素 S742 405.3 + ++ 500 Water 硫酸链霉素 S739 1457 ++ ++ 16 Water 特美汀 T869 NA ++ 200 Water 盐酸万古霉素 V870 1485 ++ 80 Water 注：1、+ + =对大多数微生物有效，+ =对某些微生物有效 2、由于不同种类的植物对抗生素的毒性敏感性存在很大差异，表中所示的植物毒性浓度可能会更高或更低。 西美杰代理的PhytoTech Labs是美国知名的植物培养基供应商，公司从1997年成立不断发展壮大，现已服务于全世界研究院所及生产研发企业。PhytoTech Labs通过ISO 9001：2000质量体系认证，所有产品按照cGMP标准生产和包装，生产过程受到严格质量控制，每个产品的物理学、化学、生物学特性都经过了严格检测，并经过组织培养检测。产品线包含植物组培培养基、植物凝胶、生长调节剂、抗生素和常见生化试剂。 北京西美杰科技有限公司做为PhytoTech Labs中国区总代理，拥有成熟的服务体系和现货库存，若您对更多产品感兴趣欢迎拨打西美杰全国客服热线400-050-4006，或者登陆官方网站www.xmjsci.com查询产品详细信息。
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